在氨氮測定的納氏試劑分光光度法中,“納氏試劑必須現(xiàn)配現(xiàn)用" 是實驗操作的鐵律。這一要求并非繁瑣規(guī)定,而是由試劑本身的化學特性決定,直接關系到測定結(jié)果的準確性與可靠性,其關鍵影響主要體現(xiàn)在三個核心層面。
首先,納氏試劑穩(wěn)定性極差,放置后易發(fā)生分解與變質(zhì)。納氏試劑主要成分是(K?HgI?),在水溶液中并非穩(wěn)定存在,尤其在光照、溫度波動或儲存容器材質(zhì)影響下,易分解產(chǎn)生汞的氧化物沉淀。這些棕紅色沉淀會懸浮于試劑中,不僅降低有效成分濃度,還會在分光光度測定時產(chǎn)生光散射,干擾吸光度讀數(shù),導致測定結(jié)果出現(xiàn)系統(tǒng)性偏差。
其次,變質(zhì)試劑會引發(fā)顯色異常,無法準確反映氨氮含量。納氏試劑與氨氮反應生成黃棕色絡合物,其吸光度與氨氮濃度呈線性關系,這是定量分析的基礎。若試劑放置過久,有效成分減少或生成雜質(zhì),會導致顯色反應不全 —— 低濃度樣品可能 “不顯色",高濃度樣品顯色偏淺或出現(xiàn)異常顏色,使標準曲線線性變差,無法通過吸光度準確換算氨氮濃度。
最后,舊試劑會引入空白值偏高的問題。空白樣的吸光度是扣除背景干擾的基準,而變質(zhì)納氏試劑自身的渾濁度、雜質(zhì)含量會顯著升高空白吸光度。當空白值超過國標 HJ 535-2009 規(guī)定的 0.030 Abs 時,會直接掩蓋低濃度水樣的真實信號,導致 “未檢出" 誤判,同時使高濃度樣品的計算值偏離真實值。
納氏試劑的變質(zhì)速度遠超預期,即使在 4℃避光冷藏條件下,有效期也不超過 24 小時。因此,嚴格遵循 “現(xiàn)配現(xiàn)用" 原則,確保試劑在有效狀態(tài)下參與反應,是保障氨氮測定數(shù)據(jù)精準的核心前提。
